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實驗原理
酪酰胺信號放大 (TSA) 技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶 (HRP) 對靶蛋白進行標記的酶學檢測方法，類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術(shù)同樣采多聚HRP的二抗，同樣有對應的“顯色”步驟，HRP催化加入反應體系的酪胺熒光素底物，產(chǎn)生活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合酪胺熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結(jié)合的一抗-二抗-HRP復合物，重復下一種一抗-HRP二抗來第二輪孵育，換另一種酪胺熒光素底物，如此往復就可實現(xiàn)多重標記。
實驗步驟
實驗案例
【技術(shù)特點】
由于每次體系中都只有單一抗體孵育，因此無需擔心抗體交叉反應以及一抗二抗種屬匹配問題，大大減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。也就是說，如果用TSA技術(shù)，同一張片子上所有的靶標都可以選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以進行實驗。
一、一鍵解決熒光多色染色中一抗來源的種屬限制問題。
二、信號放大，熒光信號放大的倍數(shù)指數(shù)性增強。
三、可以對多種蛋白在同一張切片上進行不同熒光標記，實現(xiàn)多種蛋白共定位。
【注意事項】
切片加入抗熒光猝滅劑后，4℃避光僅可保存1-2個月。
送檢與交付與標準
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
湘公網(wǎng)安備