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實驗介紹
【應用簡介】
裸鼠皮下荷瘤是指將人源或鼠源細胞注射到免疫缺陷的Balb/c 裸鼠皮下,通過施加藥物或其它條件來驗證細胞成瘤或轉(zhuǎn)移能力的實驗方法。裸鼠腫瘤模型是研究腫瘤學、免疫學、藥品與生物制品的安全性評價以及有效性篩選等研究課題的基礎。
裸鼠皮下成瘤
裸鼠是具有一定免疫缺陷的小鼠,利用這一特點可以將腫瘤細胞移植到裸鼠皮下或體內(nèi),腫瘤細胞可以吸收裸鼠自身的營養(yǎng)進行生長或轉(zhuǎn)移而不會被小鼠免疫細胞殺傷,利用這一特點可以研究腫瘤細胞在有機體內(nèi)成瘤能力、藥物對腫瘤細胞殺傷能力等問題。
【實驗方法】
Step1:準備細胞樣品,生理鹽水重懸
Step2:細胞計數(shù),注射細胞到裸鼠皮下
Step3:觀察記錄成瘤情況
Step4:處死裸鼠,取出腫瘤,做進一步研究
案例展示
HCT116細胞皮下注射(5*106個細胞)后成瘤效果圖。上:正常組 下:藥物干預組
技術總結
在裸鼠荷瘤實驗操作中有幾點需要特別注意:
1、細胞狀態(tài)對成瘤影響很大,在計劃做荷瘤實驗時務必確保細胞處于一個較好的狀態(tài),一般注射細胞數(shù)目不少于1*106個。
2、雖然裸鼠具有一定的免疫缺陷,但并不等于完全沒有排異反應,一般選擇年齡不超過7周齡的裸鼠進行實驗,年齡太大可能會影響成瘤效果。
3、注射位點的選擇也有一定技巧性,一般選擇裸鼠腋下位置注射是因為這個位置血流豐富,易于短時間成瘤。
4、建議在進行正式實驗之前,先開展預實驗,確定細胞的成瘤性。