可溶性蛋白質(zhì)分子檢測(cè)
不同的捕獲微球上包被有特異的捕獲抗體,并具有不同的熒光強(qiáng)度。捕獲微球與待測(cè)樣品溶液混合后,微球上的特異性抗體首先與樣品 (血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)液) 中的相應(yīng)抗原或蛋白結(jié)合。然后,與加入的熒光標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成“三明治”夾心復(fù)合物,通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行熒光檢測(cè)。對(duì)樣品中的各檢測(cè)因子的含量進(jìn)行分析。 檢測(cè)的樣本為組織培養(yǎng)上清、EDTA抗凝血漿和血清樣本中特定細(xì)胞因子(pg/ml)。
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實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
不同的捕獲微球上包被有特異的捕獲抗體,并具有不同的熒光強(qiáng)度。捕獲微球與待測(cè)樣品溶液混合后,微球上的特異性抗體首先與樣品 (血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)液) 中的相應(yīng)抗原或蛋白結(jié)合。然后,與加入的熒光標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成“三明治”夾心復(fù)合物,通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行熒光檢測(cè)。對(duì)樣品中的各檢測(cè)因子的含量進(jìn)行分析。 檢測(cè)的樣本為組織培養(yǎng)上清、EDTA抗凝血漿和血清樣本中特定細(xì)胞因子(pg/ml)。
【實(shí)驗(yàn)流程】
Step1:上清液離心留上清
Step2:加入相應(yīng)的微球
Step3:孵育
Step4:洗滌后離心去上清
Step5:上機(jī)檢測(cè)
注意事項(xiàng)
1、為保證所得結(jié)果的可靠性,每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球檢測(cè)儀器的變異系數(shù);
2、每次應(yīng)做陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、質(zhì)控對(duì)照、以確保將各種試劑及操作過(guò)程對(duì)結(jié)果的影響降至最低;
3、血液上清若有紅細(xì)胞溶血情況會(huì)對(duì)后續(xù)的檢測(cè)結(jié)果有影響。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
樣品類型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
---|---|---|
組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
活細(xì)胞 | 樣本量:1*106個(gè)細(xì)胞/TEST,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |