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實驗介紹
【技術原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標記的單克隆抗體，與待測成分作用，然后上流式細胞儀檢測待測細胞。待測細胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列，一個個迅速通過激光聚焦區(qū)，激光在對每個細胞進行照射時可同時得到前向角散射和側向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標記物發(fā)出的信號，利用這些信號，可計算出相對含量，從而得到細胞群的相對比值。
利用不同熒光物質(zhì)標記的抗CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56單克隆抗體，與待測成分作用，然后上流式細胞儀檢測待測細胞。待測細胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列，一個個迅速通過激光聚焦區(qū)，激光在對每個細胞進行照射時可同時得到前向角散射和側向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標記物發(fā)出的信號，利用這些信號，可計算出CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+、CD56+的相對含量，從而得到各細胞群的相對比值技術。
淋巴細胞是正常機體免疫系統(tǒng)功能最重要的一大細胞群，在免疫應答過程中，淋巴細胞發(fā)育成為功能不同的亞群。各亞群的數(shù)量和功能產(chǎn)生異常時，就能導致機體免疫紊亂并產(chǎn)生病理變化。淋巴細胞亞群分析是檢測細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，它總體反映機體當前的免疫功能、狀態(tài)和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾?。ㄈ缱陨砻庖卟?、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應性疾病等），分析發(fā)病機制，觀察療效及檢測預后有重要意義。利用各種單克隆抗體與淋巴細胞表面的抗原結合，再配合多色熒光染料，通過流式細胞儀檢測分析即可以把各種不同功能的淋巴亞群區(qū)分開來，進而得到各亞群的相對比例。
我們的常用檢測指標為
T淋巴細胞：CD3+CD4+CD8+
B淋巴細胞：CD3-CD19+
NK細胞：CD3-CD16+CD56
【實驗流程】
Step1：制成單細胞懸液（組織樣本）
Step2：溶血（細胞樣本無需進行此步驟）
Step3：離心去上清
Step4：調(diào)整細胞密度
Step5：加入相應的標記抗體
Step6：孵育
Step7：洗滌后離心去上清
Step8：上機檢測
案例展示
注意事項
1、新鮮全血應盡快送檢，長時間保存應放置在4-8℃；
2、使用抗凝管采集，一般采血管為EDTA與肝素抗凝管；
3、抗凝血應保證無血塊凝集。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 活細胞 | 樣本量：1*106個細胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
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