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PAS糖原染色實驗原理與步驟

2022-02-08 17:13:53

來源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺


一、PAS糖原染色實驗簡介與原理

實驗簡介:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。

實驗原理:糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,氧化劑能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。PAS技術(shù)常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。

 

二、PAS糖原染色臨床意義

隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展,近年來,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外,還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。為臨床診斷、分類和治療提供了重要的依據(jù)。

 

三、PAS糖原染色實驗步驟(樣本與實驗?zāi)康牟煌襟E均有不同)

step1:固定新鮮干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸餾水沖洗,待干

Step2:如涂片需要消化,可加唾液或麥芽糖淀酶,置室溫消化60min,然后用蒸餾水沖洗

Step3:10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸餾水沖洗,待干

Step4:置雪夫染液中室溫染色30~60min

Step5:用亞硫酸溶液沖洗3次后,再用自來水沖洗2~3min,待干

Step6:蒸餾水洗。

Step7:20g兒甲綠復(fù)染10~20min

Step8:水洗,待干,鏡檢拍照


 

 

四、PAS糖原染色常見問題分析及原因解析

1、染色過深或過淺

染色時間、分化時間過長或不夠,染色過程可在鏡下控制,適當(dāng)調(diào)整時間。

2、切片染色不均

取材固定不當(dāng),取材規(guī)范標(biāo)準(zhǔn):固定徹底;

脫水不夠,重新脫水、透明、浸蠟。

3、 切片染色模糊不清

包埋蠟溫度過高;

脫水透明不徹底。