Masson檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
來(lái)源/作者:普拉特澤生物-醫(yī)學(xué)整體課題外包
Masson實(shí)驗(yàn)的原理
Masson氏染色時(shí)膠原纖維呈藍(lán)色(被苯胺藍(lán)所染)或綠色(被亮綠所染),肌纖維呈紅色(被酸性品紅和麗春紅所染),這與陰離子染料分子的大小和組織的滲 透性有關(guān)。如已固定的組織用一系列陰離子水溶性染料先后或混合染色,則可發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞被最小分子的陰離子染料著染,肌纖維與胞質(zhì)被中等大小的陰離子染料著染,而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染。由此說(shuō)明了紅細(xì)胞對(duì)陰離子染料的滲透性最小,肌纖維與胞質(zhì)次之,而膠原纖維具有最大的滲透性。根據(jù)組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子染料進(jìn)行染色,便可把不同組織成分顯示出來(lái)。
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
對(duì)大鼠皮膚樣本進(jìn)行Masson染色,用于顯示組織中的纖維。
二、實(shí)驗(yàn)樣本及分組
樣本:大鼠皮膚組織
分組:control組1 day3、control組3 day3、control組4 day3、、control組5 day7、control組6 day5、control組7 day7、control組8 day14、 control組9 day14
實(shí)驗(yàn)組1 day14、實(shí)驗(yàn)組2 day14、實(shí)驗(yàn)組3 day7、實(shí)驗(yàn)組4 day14、實(shí)驗(yàn)組5 day7、實(shí)驗(yàn)組6 day3、實(shí)驗(yàn)組7 day3、實(shí)驗(yàn)組8 day3、實(shí)驗(yàn)組9 day7
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
control組1 day3 實(shí)驗(yàn)組1 day14
圖1 Masson染色示意圖 100×
問(wèn)題:樣本結(jié)痂部位形態(tài)不完整,易出現(xiàn)碎裂褶皺及深染。
結(jié)痂部位Masson染色圖 40X
正常皮膚部位Masson染色圖 40X
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
膠原纖維、粘液、軟骨呈藍(lán)色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色,胞核黑藍(lán)色。
五、實(shí)驗(yàn)材料
5.1主要耗材
儀器名稱(chēng) | 品牌 | 型號(hào) |
生物組織攤烤片機(jī) | 武漢俊杰電子有限公司 | JK-6 |
顯微鏡 | 萊卡 | DM2000 LED |
蓋玻片 | 世泰 | / |
載玻片 | 世泰 | / |
5.2主要試劑
產(chǎn)品名稱(chēng) | 品牌 | 貨號(hào)/規(guī)格 |
Masson三色染色液 | Frdbio | BHC0620 |
中性樹(shù)膠 | 中國(guó)上海標(biāo)本模型廠 | 100 g |
無(wú)水乙醇 | 湖南匯虹 | 塑AR2500 ml |
二甲苯 | 湖南匯虹 | AR500 ml |
六、實(shí)驗(yàn)步驟
(1) 石蠟切片脫蠟至水。
(2) 鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。
(3) 依次自來(lái)水和蒸餾水洗。
(4) 用蘇木精染液染核5-10 min。
(5) 充分水洗,如過(guò)染可鹽酸酒精分化,蒸餾水洗。
(6) 用Masson復(fù)合染色液染色10-20 min,蒸餾水洗。
(7) 1% 磷鉬酸水溶液分化3-5 min。
(8) 不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍(lán)或光綠液染5 min。
(9) 以1%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
(10) 95%酒精、無(wú)水酒精、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封固,顯微鏡觀察。
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